产品展示
PRODUCT DISPLAY
行业资讯您现在的位置:首页 > 行业资讯 > 分光光度计的测量方法
分光光度计的测量方法
  • 发布日期:2015-07-04      浏览次数:923
    • 分光光度计的测量方法主要有以下几种方法

      Lowry 法:以zui早期的 Biuret 反应为基础,并有所改进。蛋白质与Cu2+反应,产生蓝色的反应物。但是与 Biuret相比,Lowry 法敏感性高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂;反应需要的时间较长;容易受到非蛋白物质的影响;含EDTA,Triton x-100,ammonia sulfate 等物质的蛋白不适合此种方法。
      BCA(Bicinchoninine acid assay)法:这是一种较新的、敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与Cu2+反应产生 Cu+,后者与 BCA 形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在 562 nm波长。此化合物与蛋白浓度的线性关系极强,反应后形成的化合物非常稳定。相对于 Lowry 法,操作简单,敏感度高。但是与 Lowry法相似的是容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。
      Bradford 法:这种方法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应,产生的有色化合物吸收峰595 nm。其zui大的特点是,敏感度好,是 Lowry 和 BCA 两种测试方法的 2倍;操作简单,速度快;只需要一种反应试剂;化合物可以稳定1小时,方便结果;而且与一系列干扰 Lowry,BCA 反应的还原剂(如DTT,巯基乙醇)相容。但是对于去污剂依然是敏感的。zui主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大,无可比性。
      某些初次接触比色法测定的研究者可能为比色法测出的结果并不一致,感到迷惑,究竟该相信哪种方法?由于方法反应的基团以及显色基团不一,所以同时使用几种方法对同一样品得出的样品浓度无可比性。例如:Keller 等测试人奶中的蛋白,结果 Lowry,BCA测出的浓度明显高于Bradford,差异显著。即使是测定同一样品,同一种比色法选择的标准样品不一致,测试后的浓度也不一致。

      水分测定仪,哈尔滨宇达电子技术有限公司。

    联系方式
    • 电话

      86-0451-82131929

    • 传真

      86-0451-82120636

    在线客服